目前检测microRNAs的挑战是通常两个传统的PCR引物不适合miRNA目标,因为引物的组合长度几乎是microRNAs长度的两倍。现有的技术通过使用例如发夹引物,添加polyA尾,或通过连接添加片段延伸微microRNAs已经解决了这个问题,然而,这些方法缺损害了检测的灵敏度和特异性。此外,这些方法不能检测在3’端修饰的microRNAs,因为会干扰延伸过程。
BioVendor新推出检测miRNA的Two-Tailed RT-qPCR方法提供了一个优越的解决方案。Two-Tailed RT-qPCR不是使用单一的结合探针,而是使用两个半探针(hemiprobes),它们结合到microRNA的不同片段,并通过折叠的系绳连接。虽然每一个半探针都太短而不能结合microRNA,但当两者互补时,它们就会协同结合。
图1. Two-Tailed RT-qPCR检测原理
● Two-Tailed RT-qPCR检测优势:
1. 引物结合特异性强
2. 形成cDNA后可以使用2个序列特异性引物进行PCR扩增
3. SYBR以及水解探针均可以使用
4. 适用一管多色以及单色qPCR后的双管多色的反转录
● 产品列表
货号 | 产品名称 | 规格 |
RDTTRT50 | Two-Tailed cDNA Synthesis System 50 rxn | 50 rxn |
RDTTPCR150 | Two-Tailed qPCR Master Mix 150 rxn | 150 rxn |
RDTT000****PRI | Two-Tailed RT/ PCR Primers | 50 rxn/ 150 rxn |
****代表不同miRNA名称编号
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